超分辨率显微镜平台

超分辨率显微镜平台LiveCodim是一个通用的超分辨率成像平台，具有任何标准荧光显微镜使用的接口。它是高分辨率、低光毒性的活体成像解决方案。
超分辨率显微镜平台应用
超分辨率显微镜平台建立了一种新的超分辨率成像模式，为SR在细胞生物学中的主要关键挑战提供了答案：保持生物样品的完整性、技术复杂性。
超分辨率显微镜平台包含一个通用的附加组件，用于任何标准显微镜。它包括宽视场、共焦和超分辨率模式，以提供一个完整的解决方案，特别适合改装。
这项技术基于获得**的锥形衍射显微镜（CODIM）强大的光束整形器，能产生可控的和局部的光模式，用于扫描光毒性非常低、光漂白可以忽略的生物样品。

超分辨率显微镜平台工作步骤
di步：
在共焦显微镜上设置定期实时观察，并you化图像采集设置。
第二步：
将所需区域放置在整个视野的中心，并执行5倍共焦放大。
第三步：
选择要在超分辨率模式下成像的感兴趣区域，并定义CODIM采集设置。
第四步：
启动CODIM超分辨率采集，然后在共焦窗口中确认结果。
第五步：
反复重复这个过程，检查多个区域。
超分辨率显微镜平台you势
•高性能超分辨率多色成像| 4个荧光通道
•分辨率*hao或等于120 NM XY |使用光结构和扫描点方法提高分辨率
•活体细胞成像׀低光毒性和低光漂白使体内SR研究成为可能
•穿透深度׀Z叠加能力和“抑制”来自其他平面的信号
•标准样品制备׀标准荧光显微镜样品制备流程
•与所有荧光显微镜无缝集成
•精简易用的应用׀自主处理算法，无需用户调整多个参数

超分辨率显微镜平台技术
锥形衍射光束整形器
2006年，gabriely.Sirat证明了锥形衍射可以作为一种实用的光束整形工具，并建议创建一种多功能的光束整形器，并将其应用于超分辨荧光显微镜。薄双轴晶体将规则入射光束的点扩散函数（PSF）转化为一系列广泛的光分布，分布的选择由输入和输出偏振控制。
实际上，光束整形是通过在可控偏振器之间封闭双轴晶体来实现的；这种简单的光学装置，类似于偏振计，能够在微秒甚至*快的时间内从一种模式切换到另一种具有不同拓扑结构的模式。此外，这些图案是完全共局域化的，因为它们是由相同的主光束产生的。
利用CODIM实现超分辨率
CODIM光束整形器被用作共焦模块的附加组件，并在样品上扫描分布，为每个扫描点产生几个显微图像。由于点扫描的几何结构，我们的系统创建了一个减少的漫射光数量相比，基于广域技术。
CODIM光束整形器使用锥形衍射原理产生紧凑的局部光分布。每个显微图像包含大量的高频，接近阿贝极限（与艾里模式相比，高达3倍）（图4）。
投影在样品上的这些光分布是使用复杂的专有算法进行分析的。这允许重建超分辨率图像，对于一般物体，分辨率提高到2倍。此外，这些算法，利用正约束和稀疏性，允许分辨率进一步提高，为足够的样本。
zui终，低得多的峰值功率分布、高量子产率相机的使用以及*长的相机曝光时间的结合，大大降低了发送到样品的光的峰值功率和能量。这就是这种方法光漂白和光毒性很低的原因。这也避免了荧光团饱和的问题，使该方法线性和定量。