双侧倒置选择平面照明显微镜diSPIM采用两个倒置选择性光片显微镜搭建而成,是一种灵活的且易于使用的选择性平面照明显微镜SPIM平台,当安装倒置显微镜时,diSPIM显微可提供双视图方式观察样本的双重视图。双侧倒置选择平面照明显微镜的头可安装在各种类型的倒置显微镜上,方便用户使用。
双侧倒置选择平面照明显微镜采用ASIImaging公司光学机械,包括位移台机械,2D振镜产生光片,压电物镜位移器等,还配备各种物镜,激光器和科研型CCD相机。
双侧倒置选择平面照明显微镜diSPIM成功用于盖玻片上培养的细胞,细胞嵌入到克氏凝胶,斑马鱼胚胎领域。
双侧倒置选择平面照明显微镜diSPIM独特之处-双侧光片
两边双侧都有光片扫描器、压电物镜定位器和科研型CCD相机。在实验过程中从两个视图中采集图像堆,以及两个图像数据库在计算机层面被合并产生
各向同性分辨率的3D图像数据库(常见轴向分辨率较差的问题通过另外一个视图的图像信息而弥补)。如果需要可以在单面操作。
双侧光片显微镜you点:XY和Y分辨率都非常高-采样成像速度极高,空间分辨率极高,非常适合活细胞成像
双侧光片缺点:购买*多的硬件,各向同性分辨率需要采集数据后处理。
双侧倒置选择平面照明显微镜特点
低光漂白:与传统
共聚焦或转盘式
共聚焦相比,光漂白要降低10倍
高速3D成像并带有各向同性分辨率特点
轴向分辨率高,是传统
共聚焦或转盘式
共聚焦的两倍
成像速率高达200平米/秒
传统通用的样品固定,盖玻片或开放式的培养皿中
模块化而灵活搭配
双侧倒置选择性平面照明显微镜规格参数
视场:>400微米(对角线)
分辨率:380nm @500nm波长 在XYZ三轴方向
样品大小:对于平面样品不限制,对于半球状样品半径zui大为3.5mm
(上述指标受到物镜参数影响,上述指标采用Nikon 40x/0.8WD物镜)
样品固定:盖玻片或培养皿
成像深度:30~150微米 (受样品和散射影响)
光子显
微操作:采用倒置显微镜物镜
培养环境:25~40摄氏度,CO2和湿度控制
兼容相机:任何sCOMS相机带有外部触发功能
兼容激光器:任何TTL控制的激光器,zuihao双光纤输出
采集模式:同步控制切片扫描,压电扫描,位移台扫描和固定光片扫描
多点采集:时间点,多位置,多色(zui高4种)混合采集
双侧倒置选择性平面照明显微镜概念
将两个物镜以成直角放置在培养皿样品的上部,每个物镜与培养皿平面成45度。一个物镜产生光片,使用另一个物镜成像。通过移动光片通过样品收集一系列图像堆,在双选择性光片照明显微镜ct-dSPIM的情况下,样品通常使用XY位移台通过固定的光片移动。对于某些应用程序,来自单个视图或图像堆的3D信息就足够。对于双视图系统,两个物镜的作用相反,从垂直方向收集另一个物镜的图像。这两个图像数据可以通过计算机融合得到具有各向同性分辨率的三维图像数据集,另外一个物镜的视图就克服了轴向分辨率较差的问题。